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abbexa abx251458说明书

更新时间：2020-06-12 点击次数：907

abbexa abx251458说明书

人催乳素诱导蛋白（PIP）ELISA试剂盒

货号： abx251458

人催乳素诱导蛋白ELISA试剂盒是针对人催乳素诱导蛋白（PIP）的ELISA试剂盒。

目标	催乳素诱导蛋白
反应性	人的
经过测试的应用	ELISA法
建议稀释	宜稀释度/浓度应由终用户确定。
存储	装运温度为4°C。收到后，按照试剂盒手册中的存放说明存放试剂盒。
有效期	该套件的有效期为6个月。
稳定性	试剂盒的稳定性取决于活性丧失的速率。在适当的存储条件下，有效期内的丢失率小于5％。为了大程度地降低性能波动，应严格控制操作程序和实验室条件。还强烈建议整个测试始终由同一用户执行。
UniProt主AC	P12273（UniProt， ExPASy）
UniProt次级AC	A0A963，A0A9C3，A0A9F3，A4D2I1
UniProt条目名称	PIP_HUMAN
基因符号	画中画
凯格	hsa：5304
串	9606.ENSP00000291009
测试范围	31.2 pg / ml-2000 pg / ml
标准格式	冻干
ELISA检测	比色法
ELISA类型	三明治
ELISA数据	定量的
样品类型	血清，血浆和其他生物液体。
测定原理	该试剂盒基于三明治酶联免疫吸附测定技术。将抗体预包被到96孔板上。将标准品，测试样品和生物素偶联试剂添加到孔中并孵育。然后加入结合了HRP的试剂，并孵育整个平板。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。TMB底物用于定量HRP酶促反应。添加TMB底物后，只有包含足够PIP的孔才会产生蓝色产物，然后在加入酸性终止液后变为黄色。黄色的强度与板上的PIP量成正比。在酶标仪中于450 nm处用分光光度法测量光密度（OD），由此可计算出PIP的浓度。
套件组件	预涂96孔微孔板标准标准稀释液洗涤缓冲液检测试剂A 检测试剂B 稀释剂A 稀释剂B TMB基板停止解决方案封口机
必需但未提供的材料	37°C恒温箱多通道和单通道移液器以及无菌移液器吸头喷瓶或自动微孔板清洗机 1.5毫升管蒸馏水吸收性滤纸 100毫升和1升量筒酶标仪（波长：450 nm） ELISA摇床
样品收集/准备	血清：应将样品收集到血清分离管中。在4°C或室温下放置长达60分钟，使管子在垂直位置静置过夜，以凝结血清。以约1000×g的速度离心20分钟。立即分析血清或等分试样并储存在-20°C或-80°C下。血浆：使用肝素或EDTA作为抗凝剂收集血浆。收集30分钟内以1000×g离心15分钟。立即测定或分装并保存在-20°C或-80°C下。避免溶血和高胆固醇样品。组织匀浆：组织匀浆的制备取决于组织类型-这仅是示例。用冰冷的PBS冲洗组织以去除多余的血液。均质前称重。切碎组织，用组织匀浆器在PBS中的冰上匀浆并超声处理细胞悬液。将匀浆以5000×g离心5分钟，收集上清液。立即测定或等分试样并在-20°C储存。
试剂准备	1）标准液：用推荐体积的标准稀释液配制标准液，制成标准溶液。然后按照协议中的说明，使用标准稀释剂缓冲液对标准溶液进行系列稀释。 2）洗涤缓冲液：按照协议中的说明，用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。 3）检测试剂制备：计算所需工作溶液的总体积。用稀释剂A和稀释剂B分别以1：100稀释检测试剂A和检测试剂B。
测定步骤	1）设置标准品，测试样品和对照孔。 2）将100μl稀释的标准液分装到标准孔中。 3）将100μl标准稀释缓冲液等分到对照（零）孔中。 4）将100μl稀释的样品等分到样品孔中。在37°C下孵育1小时。 5）将100μl检测试剂A分装到每个孔中。在37°C下孵育1小时。 6）洗3次。 7）将100μl检测试剂B分装到每个孔中。在37°C下孵育30分钟。 8）洗5次。 9）将90μlTMB底物等分到每个孔中。在37°C下孵育10-20分钟。 10）等分50μl终止溶液。 11）在450 nm下测量OD。
协议	使用前，将试剂盒的组分和样品平衡至室温（18-25°C）。建议为每个测试绘制标准曲线。 1.分别在预涂板上设置标准，测试样品和对照（零）孔，然后记录其位置。建议测量每个标准品和样品至少一式两份。 2.将100 µL的每种标准品，对照和样品加到适当的孔中。用盖密封板并在37°C孵育1小时。 3.取下盖子并丢弃液体。 4.向每个孔中添加100μl检测试剂A工作溶液。用盖密封板并在37°C孵育1小时。 5.取下盖子并丢弃溶液。用1X Wash Buffer洗涤板3次。 6.将100 µL检测试剂B工作溶液添加到每个孔中，密封并在37°C孵育30分钟。 7.弃去溶液并按照上一步中的说明用洗涤缓冲液洗涤板5次。 8.将90μlTMB底物等分到每个孔中。用盖密封板并在37°C下孵育10-20分钟。避免暴露在光线下。孵育时间仅供参考，宜时间应由用户确定。请勿超过30分钟。 9.向每个孔中添加50 µL终止溶液。立即在450 nm处读取。
结果计算	为了进行计算，请对每个参考标准品和每个样品的OD450重复读数取平均值，然后减去平均对照（零）OD450读数。可以将标准曲线绘制为每种参考标准溶液（Y）的相对OD450与每种标准溶液（X）的各自浓度的关系。可以从标准曲线内插样品的PIP浓度。
可用性	在5-12个工作日内发货。
注意	本产品仅供研究使用。范围和灵敏度可能会发生变化。请注意，我们的ELISA和CLIA试剂盒针对检测天然样品（而非重组蛋白）进行了优化。我们无法保证检测到重组蛋白，因为它们与天然蛋白可能具有不同的序列或三级结构。

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